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紅景天組培快繁技術實例 · 含配方

紅景天:高山紅景天為景天科(Crassulaceae)多年生草本或亞灌木,是珍稀藥用植物之一。含有豐富的紅景天甙、黃酮、多種維生素和微量元素,還含有有機體所必需的17種氨基酸。



近幾十年的研究表明,紅景天具有抗缺氧、抗寒冷、抗疲勞、抗輻射、抗病毒等多種功能,還具有延緩機體衰老、防止老年疾病的功效,是一種適用于特殊地區的具有很大發展前途的對環境適應性強的藥物。高山紅景天大多為天然資源,由于其生存環境惡劣,生長緩慢且年產量低,再加上需求量日益增大,使得原本就稀少的野生紅景天嚴重匱乏。通過組培快繁技術,可解決紅景天種苗的供應問題。

1

無菌培養物的建立

1.1 外植體采集與消毒滅菌

采集紅景天幼嫩葉片為外植體誘導愈傷組織。在超凈工作臺上,先用70%酒精將紅景天幼嫩葉片浸泡30s,再用0.1%氯化汞浸泡2~3min,然后用無菌水沖洗3~5次,再用無菌濾紙將外植體表面的水吸干,將葉片切成約5mm2 大小的小塊,然后接種到不同激素濃度配比的培養基上。

1.2 啟動培養

啟動培養基是MS+蔗糖3%+瓊脂0.8%,pH為5.8。培養溫度為24~26℃,光照時間10~12h/d,光照強度1500~2000lx。

2

繼代增殖培養

2.1 愈傷組織的培養

將已滅菌的葉片接種在MS+6-BA2.0mg/L+IAA0.25mg/L的誘導培養基上,經30d左右,外植體周圍產生大量的白綠色愈傷組織。愈傷組織不斷擴大,并在其表面出現綠色突起。這些愈傷組織繼續培養到40d左右,綠色突起分化成芽,繼而發育成芽簇或苗叢,并且不斷產生綠色突起和叢生芽。

2.2 叢生芽的培養

小苗叢長到4~5cm時,將小苗剪下轉接到生根培養基上(一般每瓶能剪下6~10個小苗)。再將剪完小苗的培養瓶蓋好,繼續培養20~25d,培養瓶內的小芽簇又可長到4~5cm,此時又可剪下6~10個小苗,反復3~4次后,瓶內培養基營養和水分基本耗盡,將瓶內小芽叢取出,切成3~4塊,轉接到新鮮的分化培養基上。這樣反復培養下去,即可生產出成千上萬株試管苗。


3

生根培養

將分化的苗叢取出轉接到生根培養基上,14d左右即可生出3~4條小根。生根培養基以1/2MS、B5、White作基本培養基,附加IAA0.5mg/L效果較好,其中B5、White培養基生根效果優于1/2MS。


4

試管苗馴化移植

試管苗小根長到2~3cm時,放入大棚或溫室內閉瓶煉苗15d左右,然后將瓶蓋打開,3~5d后將小苗從瓶中取出,放入清水中洗凈培養基,栽入配制好的營養土中,營養土以珍珠巖和沙子1:1混合,用營養液澆透。移栽后用薄膜蓋好,保持80%相對濕度,5~7d后,逐步撤下薄膜,加強管理,15~20d即可移入大田定植。




編者按:本文來自曹春英主編《植物組織培養》,中國農業出版社,由小編整理發布,如有不妥,敬請告知!


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